Introduction
RNA 샘플을 이용하여 정량 PCR (quantitative PCR 또는 Real Time PCR)을 진행하는 경우, RNA를 역전사반응 (reverse transcription; RT) 과정을 거쳐 cDNA로 역전사한 후 Real Time PCR을 진행하게 된다.
One-step Real Time RT-PCR (또는 One-step RT-qPCR)은 하나의 튜브에서 역전사반응과 qPCR반응을 연속적으로 진행하여, 실험을 보다 간소화할 수 있다.


그림1. One-step RT-qPCR 모식도

One-step RT-qPCR의 장점

• Simple and rapid workflow
• Compatible with large numbers of samples (when looking at few target genes)
• Adaptable to high-throughput/automated workflows

일반적으로 One-step RT-qPCR은 빠른 속도와 다수의 샘플을 분석하는 실험에 가장 적합하다.
하나의 튜브에서 진행되므로, 실험 셋업이 쉽고 liquid handler 또는 자동화 장비에 적용할 수 있어 실험시간을 줄여주고, 피펫팅에 의한 오류와 오염을 최소화할 수 있다.

Principle of one-step RT-qPCR
One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (Code RR600A, probe-based detection 제품)를 이용하면 하나의 튜브에서 PrimeScript™ III RTase를 이용하여 역전사반응을 진행한 후, TaKaRa Taq™ HS 로 qPCR을 진행한다. PCR 증폭 결과는 probe를 이용하여 실시간 모니터링 할 수 있다.

그림2. Principle of One Step RT-PCR method

이 밖에도 다카라에서는 Dye-based qPCR 또는 Probe-based qPCR을 위한 다양한 One-step RT-qPCR kit를 판매하고 있다.

One-step RT-qPCR 제품라인

검출방법	Code	제품명	용량
Probe-based detection	RR600A	One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix	200 회 (25 ㎕ 반응 시)
	RR064A	One Step PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time)	100 회 (50 ㎕ 반응 시)
Dye-based detection	RR096A	One Step TB Green® PrimeScript™ PLUS RT-PCR Kit (Perfect Real Time)	100 회 (50 ㎕ 반응 시)
	RR066A	One Step TB Green® PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time)	100 회 (50 ㎕ 반응 시)

Citations
RR064A: Ma, W. et al. Zika virus causes testis damage and leads to male infertility in mice. Cell 167, 1511-1524.e10 (2016).
RR064A: Xie, Y., Wang, M., Xu, D., Li, R. & Zhou, G. Simultaneous detection and identification of four sugarcane viruses by one-step RT-PCR. J. Virol. Methods 162, 64-68 (2009).
RR086A: Zou, Q. et al. Use of Praziquantel as an adjuvant enhances protection and Tc-17 responses to killed H5N1 virus vaccine in mice. PLoS One 7, e34865 (2012)