본 제품은 ‘
국가줄기세포은행 표준절차서’ SOP#6 ‘마이코플라스마 시험 (루미노메터)’에 사용된 제품입니다.
* MycoAlert Mycoplasma Detection Kit는 MycoAlert PLUS mycoplasma detection kit 으로 upgrade 되었습니다.
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제품설명
Mycoplasma는 배양세포나 배지 등의 오염균으로서 잘 알려져 있으며, 오염율이 15% 이상을 나타내는 연구도 있다. Mycoplasma의 감염은 실험 결과에 중대한 영향을 미치기 때문에, 신속히 감염의 유무를 아는 것이 중요하다. 원핵생물인 mycoplasma는 일반적으로 사용하는 필터는 통과하며, 또한 대부분의 항생 물질에 저항성이 있기 때문에, 제거하는 것이 어렵다. 그러므로 세포를 subculture할 때마다 mycoplasma의 검사를 실시하여, 필요한 처치를 하는 것이 필요하다.
MycoAlert Mycoplasma Detection Kit는 배양 세포에서 문제를 일으킬 수 있는 Mycoplasma를 매우 간편한 방법으로 단시간에 검출할 수 있는 키트이다. 종래 의 검출 방법으로는 판정까지 수시간~수일이 필요하지만, 본 제품을 이용할 경우, 20분 이내에 검출이 가능하다.
MycoAlert Assay Control Set는 동결건조된 positive control (1㎖)과 assay buffer로 구성되어 있다. 본 키트를 이용하여 모든 실험과정과 모든 assay 시약이 올바르게 사용되었는지를 확인할 수 있다. 또한 assay 버퍼는 음성 대조군도 사용이 가능하다. 양성 대조군에는 실제 mycoplasma는 포함되어 있지 않다.
내용
MycoAlert Mycoplasma Detection Kit
| 1. MycoAlert Reagent, Lyophilized |
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| 2. MycoAlert Assay Buffer |
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| 3. MycoAlert Substrate, Lyophilized |
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MycoAlert Assay Control Set
| 1. Lyophilized positive control |
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| 2. Assay Buffer |
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보존
MycoAlert Mycoplasma Detection Kit：2~8℃
MycoAlert Assay Control Set：4℃
성능
| 감도 |
PCR, 형광 색소법으로 negative로 판정된 False Negative 샘플에서도 검출 가능. |
| 검출 가능한 균 |
Mycoplasma, Acholeplasma (Yeast, 대장균은 검출 안됨.) |
- 모든 Mycoplasma 종을 신속히 검출할 수 있다
- 20분 이내에 Mycoplasma 오염을 판별할 수 있다
- 시약 첨가 후 Luminometer 측정으로 매우 간단하다
특징
- 신속성 - 세포배양액으로부터 검출까지 20분정도 소요 (기존의 다른 방법은 수시간에서 수주일까지 소요)
- 편리성 - 세포배양액 100 ul에 두 개의 시약을 혼합한 후, Luminometer로 두 번만 측정하면 됨.
- 범용성 - 새포배양시 보통 오염되는 모든 종의 Mycoplasma와 Acholeplasma 검출 가능.
- 민감성 - 매우 적은양의 mycoplasma도 검출하므로, PCR법과 형광색소법에서 나타나는 false negative를 판정할 수 있다.
- 완벽함 - assay에 필요한 모든 시약이 포함되어 있음.
원리
본 키트를 이용한 검출은 mycoplasma가 가지는 효소 활성을 이용한다. 샘플 중의 mycoplasma를 용해하여, mycoplasma의
효소를 MycoAlert Substrate와 반응시키면 ADP가 ATP로 변환된다. MycoAlert Substrate를 첨가 전 (A)·후 (B)의 샘플의
ATP level을 측정하여, Reading B/ Reading A의 비율을 구하여 샘플중의 Mycoplasma 의 유무를 판정할 수 있다.
대부분의 Mycoplasma, Acholeplasma 의 검출이 가능하다.
