제품설명
본 제품은 Taq DNA polymerase (TaKaRa Taq™, TaKaRa Ex Taq®, TaKaRa LA Taq®, SpeedSTAR™ HS 등)로 증폭하여 3’ 말단에 dA 단일염기가 부가된 PCR 산물을 cloning하기 위한 T vector이다.
EcoR V 효소로 절단된 후 각 3’ 말단에 dT 염기가 부가되어 있어 Taq DNA polymerase 계열의 효소로 증폭된 PCR 산물에 바로 ligation하여 blue/white screening 할 수 있다. 또한 T-Vector pMD20은 MCS site 상류에 SP6 promoter 서열을 가지고 있어, SP6 RNA polymerase를 이용하여 cloning 유전자에 상보적인 single strand RNA를 합성할 수 있다.
T-Vector pMD19 (Simple)는 pUC19을 기본으로 설계되어 있지만, pUC19 MCS site가 모두 제거되어 있어 cloning 후 PCR 산물에 존재하는 제한 효소 사이트를 이용하는 경우에 유용하다.
[주의]
다카라의 high fidelity PCR 효소인 PrimeSTAR®시리즈 또는 TaKaRa Ex Premier에서 증폭된 PCR 산물은 대부분 blunt end로, 본 T vector에 그대로 cloning 할 수 없다.
이 경우, PCR 산물의 3’ 말단에 dA 염기를 부가하는 시약이 포함된 Mighty TA-cloning Reagent Set for PrimeSTAR® (Code 6019) 를 이용하여 편리하게 TA cloning을 진행할 수 있다.
T-Vector pMD20, T-Vector pMD19 (simple)
내용 (20회)
20 ㎕ |
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T-Vector pMD20 또는 T-Vector pMD19 (Simple) (50 ng/㎕) |
10 ㎕ |
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Control Insert (50 ng/㎕)* |
*3’ 말단에 dA 염기를 포함하는 약 500 bp의 DNA 단편
보존 -20℃
관련제품
- PrimeSTAR® 등 High fidelity 효소를 증폭산물의 TA-cloning Mighty TA-cloning Reagent Set for PrimeSTAR® (Code 6019)
- TaKaRa Ex Taq®등 Taq 기반 polymerase의 증폭산물의 TA-cloning Mighty TA-cloning Kit (Code 6028)
참고자료
- Cloning 실험 입문자를 위한 ‘Step by Step Cloning 가이드’
- 실험 목적별로 추천하는 Cloning Kit
