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제품설명
Agrobacterium tumefaciens (Rhizobium radiobactor)는 Ti-plasmid의 일부인 T-DNA (transfer DNA)를 숙주 식물의 세포 안으로 이동시켜 식물 염색체 DNA에 삽입한 후, T-DNA 상의 유전자를 발현시킴으로써 감염 부위에 근두 암종 (Crow gall)을 형성한다.
이 기전을 활용해 T-DNA의 병원성 유전자를 제거하고 selective marker gene과 exogenous target gene를 cloning 하는 것으로 숙주 식물 세포 핵의 DNA에 외래 유전자를 삽입하고 (Agrobacterium-mediated gene transfer), 식물체를 형질전환하는 binary vector법이 고안되었다.
Agrobacterium tumefaciens LBA4404 균주는 binary vector법의 개발자인 네덜란드의 라이덴 대학의 P. JJHooykaas 교수 그룹이 개발한 균주이다. 이 균주는 T-DNA의 vir region (vir gene의 유도와 T-DNA transfer에 관여)을 가진 pAL4404 플라스미드를 포함하고 있다. 본 제품은 T-DNA를 사용한 식물 세포 형질전환에 널리 사용되는 균주이다.
내용 (20회)
Agrobacterium tumefaciens LBA4404 Electro-Cells |
40 ㎕ x5 |
pRI 900 DNA (1 ng/㎕) *1 |
10 ㎕ |
SOC Medium*2 |
1 ㎖ x10 |
*1pRI 909 DNA (Code 3261)에서 MCS를 제외한 plasmid 이다.
*2 SOC Medium의 조성
| 2 % |
|
Tryptone |
0.5 % |
Yeast extract |
10 mM |
NaCl |
2.5 mM |
KCl |
10 mM |
MgSO4 |
10 mM |
MgCl2 |
20 mM |
Glucose |
[주의]
SOC Medium을 녹였을 때 드물게 침전이 생길 수 있으나 품질에는 문제가 없다.
침전물이 생긴, 경우 실온에서 섞거나 37℃에서 몇 분간 데워서 침전을 용해시킨 후 사용한다.
보존 -80℃
주의: 적절한 온도에서 보관되지 않은 경우 형질 전환 효율이 떨어질 수 있다.
이 외의 조건에서 보관된 경우, 제품 내에 포함된 pRI 900 DNA를 이용해 형질전환 효율을 확인 후 사용한다.
액체 질소에는 보관하지 않는다.
용도
- Transgenic recombinant 식물 제작
- 식물로의 T-DNA transfer
- Binary vector delivery
- 고효율 plasmid transformation
형질전환 효율
사용자 메뉴얼에 따라 1 ng의 pRI 900 DNA를 형질전환 후 kanamycin과 streptomycin을 포함한 plate에서 selection 한 결과, > 5 x 106 colonies/㎍의 효율을 얻었다.
관련제품
- 식물 형질전환용 고발현 T-DNA vector pRI 201-AN DNA (Code 3264 외)
- 추출이 어려운 식물 샘플에서도 고순도 RNA 정제 TaKaRa MiniBEST Plant RNA Extraction Kit (Code 9769A)
- 추출이 어려운 식물 샘플에서도 고순도 DNA 정제 TaKaRa MiniBEST Plant Genomic DNA Extraction Kit (Code 9768A)
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