제품설명

본 제품은 Chaperone Plasmid Set (Code 3340)에 포함되어 있는 5종류의 chaperone plasmid를 각각 형질 전환한 E. coli BL21주의 competent cell이다.
본 제품에 있는 5 종류의 plasmid (pG-KJE8, pGro7, pKJE7, pG-Tf2, pTf16)는 단백질의 folding에 함께 관여한다고 알려져 있는 여러 가지 분자 chaperone이 각각 하나의 plasmid상에 코드 되어 chaperone 팀으로 효율적으로 발현하도록 설계되어 있다. 이러한 Chaperone 팀과 목적 단백질을 co-expression시키는 것으로 발현 단백질의 가용화를 촉진시킬 수 있다.
E. coli BL21주는 lon protease, ompT 외막 protease가 결손된 B주 유래의 균주로써, 발현 단백질의 안정성을 향상시킬 수 있어 재조합 단백질 발현에 널리 이용되고 있다.
일반적으로 Chaperone plasmid를 이용하여 목적 단백질과 chaperone 팀의 co-expression을 실시하려면, 먼저 chaperone plasmid로 숙주 E. coli를 형질 전환하여 형질 전환체로 competent cell을 제작한 후, 목적 단백질을 발현하는 plasmid를 형질 전환시켜야 한다.
본 제품은 Chaperone plasmid 로 형질 전환한 BL21주로부터 조제한 competent cell이므로 한 번의 형질 전환으로 간단하게 목적 단백질과 chaperone 팀이 co-expression된 E. coli를 얻을 수 있다.
Chaperone plasmid 5 종류 외에 chaperone plasmid를 포함하지 않아 control용으로 사용할 수 있는 BL21 competent cell도 판매하고 있다.
본 제품은 특히 Cold shock expression vector pCold DNA 시리즈 (Code 3360-3364)와 함께 사용하면 높은 효과를 얻을 수 있다.

주) 본 제품의 숙주인 BL21주는 T7 RNA Polymerase를 발현하지 않아, pET 시스템 등 T7 promoter를 이용한 발현 시스템에는 사용할 수 없다.
주) 본 제품은 Electroporation에는 사용할 수 없습니다.

구성

Chaperone Competent Cells BL21 Set (Code 9120)

1.	Chaperone Competent Cells pG-KJE8/BL21	100 ㎕× 3개
2.	Chaperone Competent Cells pGro7/BL21	100 ㎕× 3개
3.	Chaperone Competent Cells pKJE7/BL21	100 ㎕× 3개
4.	Chaperone Competent Cells pG-Tf2/BL21	100 ㎕× 3개
5.	Chaperone Competent Cells pTf16/BL21	100 ㎕× 3개
6.	TaKaRa Competent Cells BL21	100 ㎕× 3개
7.	pUC19 DNA (0.1 ng/㎕)	10 ㎕× 1개
8.	3. SOC Medium*	1 ㎖× 18개

ㆍ Chaperone Competent Cells pG-KJE8/BL21 (Code 9121)
ㆍ Chaperone Competent Cells pGro7/BL21 (Code 9122)
ㆍ Chaperone Competent Cells pG-Tf2/BL21 (Code 9124)
ㆍ Chaperone Competent Cells pTf16/BL21 (Code 9125)
ㆍ TaKaRa Competent Cells BL21 (Code 9126)

Chaperone Competent Cell (Code 9121~9126)

1.	TaKaRa Competent Cells BL21	100 ㎕× 10개
2.	pUC19 DNA (0.1 ng/㎕)	10 ㎕× 1개
3.	SOC Medium*	1 ㎖× 10개

* SOC Medium 조성
2 %	Tryptone
0.5 %	Yeast extract
10 mM	NaCl
2.5 mM	KCl
10 mM	MgSO4
10 mM	MgCl2
20 mM	Glucose

[주의]
SOC Medium을 녹일 때 간혹 침전이 생기는 경우가 있습니다.
이러한 경우, 실온에서 잘 섞거나 37℃에서 몇 분간 데워서 침전물을 녹인 후 사용하세요.

보존

-80 ℃

Chaperone plasmid map

No.	Plasmid	Chaperone	Promoter	Inducer	Resistant Marker	Sequence
1	pG-KJE8	dnaK-dnaJ-grpE groES-groEL	araB Pzt-1	L-Arabinose Tetracyclin	Cm	link
2	pGro7	groES-groEL	araB	L-Arabinose	Cm	link
3	pKJE7	dnaK-dnaJ-grpE	araB	L-Arabinose	Cm	link
4	pG-Tf2	groES-groEL-tig	Pzt-1	Tetracyclin	Cm	link
5	pTf16	tig	araB	L-Arabinose	Cm	link

<이용할 수 있는 발현용 플라스미드>
본 제품에 포함된 Chaperone plasmid는 pACYC의 복제 기점 및 chrolamphenicol 내성 유전자 (Cm r 유전자)을 포함하고 있어 가장 널리 사용되는 ColE1 타입의 ampicillin 내성 유전자를 포함한 발현용 plasmid를 사용할 수 있다. 각 Chaperone 유전자는 araB 또는 Pzt-1 (tet) promoter 하류에 배치되어 있어, 목적 유전자를 lac 등 다른 promoter 하류에 두면 목적단백질과 chaperone 단백질을 따로 발현시킬 수 있고, 각 promoter에 필요한 컴포넌트 (araC 또는 tetR)은 plasmid 상에 배치되어 있다.
단, Chrolamphenicol 내성 유전자를 포함한 발현 plasmid 와는 함께 사용할 수 없다.
본 제품은 특히 Cold shock expression vector인 pCold™ DNA 시리즈 (Code 3360-3364), pCold™ TF DNA (Code 3365), pCold™ ProS2 DNA (Code 3371), pCold™ GST DNA (Code 3372)와 같이 사용하면 목적 단백질을 높은 효율로 발현시킬 수 있다.

Genotype

E.coli BL21：F^-, ompT, hsdS _B (r_B^- m_B^-), gal, dcm

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