제품설명
본 제품은 LA PCR 원리를 응용한 3’→ 5’exonuclease 활성 (proof reading 활성)을 갖는 내열성 DNA polymerase이다. 일반적인 PCR 조건에서 기존의 Taq polymerase에 비하여 높은 증폭효율을 보이며, 기본적으로 어떠한 반응에도 적용할 수 있으나 특히 15 kb 이상의 증폭에 효과적이다.
또한 GC-rich 서열을 증폭하는 경우, 최적화된 buffer가 첨부된 TaKaRa LA Taq® with GC buffer (Code RR002AG/BG)를 사용하면 효과적이다.
TaKaRa LA Taq®시리즈는 반응용 buffer (Mg2+ 포함 또는 Mg2+ 별도제공) 와 dNTP mixture가 함께 제공된다.
PCR 산물
TaKaRa LA Taq을 이용하여 증폭한 PCR 산물의 대부분은 3’말단에 A가 1염기 추가되어 있다. 따라서, PCR 산물을 그대로 T-vector에 cloning 할 수 있다.
단, 긴 PCR 산물(5 kbp 이상)의 T-vector에 cloning은 효율이 좋지 않다. 또한 말단평활화 및 인산화를 통해 평활말단 vector로 cloning이 가능하다
내용 (250 U)
TaKaRa LA Taq® (Code RR002A)
| 1. TaKaRa LA Taq (5 U/㎕) |
25 ㎕ |
| 2. 10× LA PCR Buffer II (Mg2+ Free) |
1 ㎖ |
| 3. MgCl2 (25 mM) |
1 ㎖ |
| 4. dNTP Mixture (각 2.5 mM) |
400 ㎕ |
TaKaRa LA Taq®with GC Buffer(Code RR02AG)
| 1. TaKaRa LA Taq (5 U/㎕) |
25 ㎕ |
| 2. 2×GC Buffer I* (5 mM Mg2+ plus) |
1.25 ㎖ |
| 3. 2×GC Buffer II* (5 mM Mg2+ plus) |
1.25 ㎖ |
| 4. dNTP Mixture (각 2.5 mM) |
400 ㎕ |
*Code RR002AG/BG에는 2종류의 buffer가 첨부되어 있다.
2×GC Buffer I을 사용하여 증폭이 되지 않는 template의 경우는 Buffer II를 사용하면 증폭 효율이 향상될 수 있다.
TaKaRa LA Taq®(Code RR002M)
| 1. TaKaRa LA Taq (5 U/㎕) |
50 ㎕ |
| 2. 10× LA PCR Buffer II (Mg2+ plus) |
1 ㎖ |
| 3. dNTP Mixture (각 2.5 mM) |
800 ㎕ |
* TaKaRa LA Taq
® 샘플은 10× LA PCR Buffer II (Mg
2+ plus) 가 포함된 구성 (#RR002M의 샘플)으로 제공됩니다.
보존 -20℃
형상
20 mM |
Tris-HCl (pH8.0) |
100 mM |
KCl |
0.1 mM |
EDTA |
1 mM |
DTT |
0.5% |
Tween 20 |
0.5% |
NP-40 |
50% |
Glycerol |
첨부 dNTP Mixture 조성*
농도 |
각 2.5 mM |
형상 |
수용액 (나트륨염), pH7~9 |
순도 |
각 98% 이상 |
*dATP, dCTP, dGTP, dTTP등 몰 혼합물로 희석하지 않고 그대로 PCR반응에 이용할 수 있다.
PCR 산물에 대하여
TaKaRa LA Taq®을 이용하여 증폭한 PCR 산물의 대부분은 3’ 말단에 A가 1염기 부가되어 있다. 따라서 이 PCR 산물을 그대로 T-vector pMD20 (Code 3270) 또는 T-vector pMD19 (Simple) (Code 3271)에 cloning할 수 있다. 또한 말단 평활화 및 인산화 후, 평활 말단 vector에 cloning할 수도 있다.
관련제품
- 비특이적인 증폭을 방지: TaKaRa LA Taq® Hot Start Version
- 2x PCR master mix: One Shot LA PCR™ Mix Ver. 2.0
- 역전사반응을 위한 all-in-One kit: PrimeScript™ 1st strand cDNA Synthesis Kit
- 5x premix 역전사 시약: PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix
- 다양한 샘플의 DNA 정제에 최적: TaKaRa MiniBEST Universal Genomic DNA Extraction Kit
- 올라운드 Agarose: SeaKem® LE Agarose
- 5분만에 전기영동 완료! Precast gel system: FlashGel™ System
- 컴팩트한 96 well gradient PCR 기기 : Clontech PCR Thermal Cycler GP
